HPLC是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，实现对试样的分析。主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的分析，具体分为定性与定量。

HPLC主要可解决如下几方面的问题：不挥发性化合物分析测定；极性化合物的分析测定；热不稳定化合物的分析测定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析测定。但是，区别于液质联用（LCMS），LCMS一般可以通过对物质的碎片峰信息进行定性或定量，HPLC是通过物质出峰时间及峰面积来定性或定量。所以，目前高效液相色谱在环境领域，主要应用于有标准物质参照情况下，且待测物质纯度较高，出峰时间及峰形不受其余物质干扰的定性或定量分析。

另外，所有色谱质谱类测试，涉及参数往往很多。我们会依据您的参考文献，结合实验室现存条件与经验，尽量使用相同或者相似的参数或配件。由于测试影响因素太多，没有办法保证测试参数或结果完全符合您的预期，请慎重考虑，谢谢！

粉体样品需要提供20mg以上，液体样品需要提供1ml以上，在常规溶剂中溶解性较好。

1. HPLC如何定量？

答∶HPLC定量时，最常使用外标法（定量原理：峰面积或者峰高随浓度的变化而相应变化）。若使用其他定量方式，请提前沟通。若使用外标法，除填写对接单外，您需要在对接单中额外补充：

A、目标物质的标品-做外标；

B、目标物质的浓度范围-决定外标定量范围。

2. 色谱质谱类的定量测试，什么叫做标准品，什么叫做标点，什么叫做标准曲线（标曲）？

答：定量测试某种物质的浓度，一般需要纯度为99%该物质（称为标准品）作为溶质，配置一系列浓度梯度的溶液上机测试，配置的不同已知浓度的溶剂称为标点。不同浓度的溶液为X，峰面积为Y，拟合一元一次方程，称为标准曲线。未知浓度进样之后峰面积代入一元一次方程，计算浓度。

3. HPLC如何定性？

答∶HPLC定性时，是以保留时间定性。此步骤也需要您提供标准品，通过比对标准品与待测物质的保留时间来定性。如果您样品成分复杂，存在待测物质的出峰情况受样品中其他物质的干扰的可能性，就算保留时间能与标准品对应上，但不能确认样品中含有该标准品物质。所以HPLC用于定性时目标物质纯度应该较高。

4. 目标物质含量较低，可能测不出怎么办？

可以进行浓缩的预处理，因为一般天然样往往含量较低，低于检出限，但是富集之后可以在检出限内进行定量）。缺点是需要确认合适的预处理步骤。

具体的浓缩的预处理过程务必由客户提供，因为不同目标物质浓缩步骤往往有所区别，根据目标物选择合适的浓缩步骤，对检测结果的准确性有着至关重要的作用。