细胞毒性检测是生物相容性测试的一种，检测药物或者新型材料在生物环境中的毒性情况，即通过检测材料或者药物对细胞的增殖或者生长的影响，来评价药物或材料的毒性或者活性。主要用于药物活性筛选、细胞增殖/毒性测定、抗肿瘤药效计算IC50等；常用MTT法或者CCK8法检测，另外也可以通过Live/dead双染法进行细胞成像，更直观的记录细胞的存活情况。

1.块体样品—薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等

（1）送样量：

a.与细胞的作用方式为直接接触的话，至少3个/种细胞/时间点；

b.样本处理方式为浸提的话，可参考国标ISO 10993-12 2007中的浸提方式浸提，根据浸提方式按量和检测时间点提供；

（2）制样要求：

若是需要把细胞接种到材料上的话，金属块、凝胶类样本须制备成统一大小的圆形/方形，建议制备直径为5-7 mm圆形。布料、纸片类样本可代为裁剪，默认制备直径为6 mm。

2.液体样品

送样量：根据测试时样本浓度和检测时间点而定，按照单次检测需要的3-5倍的量寄送；若采用稀释后样本测试，则须告知稀释倍数及工作液浓度；若溶剂为有机溶剂（如DMSO，醇类，酚类等），最高工作液浓度中，溶剂的占比低于0.5%。

3.粉末样品

（1）送样量：根据测试时样本浓度和检测时间点而定，按照单次检测需要的3-5倍的量寄送；

（2）不可溶粉末：注明样本性质，灭菌方式，及分散为均匀悬浮液所需必要步骤，

如果不可使用分散液，需要预试，样本量可联系本公司人员确认。

注：测试时，默认每组3个平行，每孔培养基加样量100μL。

1.灭菌方法怎么选择？

目前可以开展温高压蒸汽灭菌，紫外照射灭菌，还过滤除菌等。高温高压蒸汽灭菌（121℃、20min），最彻底的灭菌方法，推荐用此方法灭菌；或者酒精浸泡（30min），但样品不能溶于酒精；另外紫外照射灭菌（30min），不太彻底，如需延长照射让灭菌更彻底需要提前告知；如果是液体样品也可以采用过滤除菌（0.22μm的过滤器），可以除去大部分微生物。

2.如何选择用MTT法或CCK8法？

MTT：适用贴壁细胞；

CCK8：适用于贴壁细胞和悬浮细胞，与MTT或其它MTT类似产品如XTT和MTS等相比，使用方便，线性范围相对宽，灵敏度更高，重复性也优于MTT，如样品容易沉淀或残留且易溶于DMSO，建议选用CCK8法检测。

3.样品制备时采用直接接触和浸提液有何区别？

（1）浸提液试验：浸提液试验是使用浸提介质浸提样品，然后通过浸提液与细胞接触来评价细胞毒性的方法，用于细胞毒性定性和定量评定。ISO 10993-12标准升版之后，长期(>24小时，<30天)和持久(>30天)接触的样品在进行细胞毒性评价时，推荐的浸提时间是72小时，因为浸提24小时可能不足以使那些使用超过24小时的器械上的化学物质充分释放。

（2）直接接触试验：直接接触试验是通过样品直接与细胞接触来评价细胞毒性的方法。固体样品可直接置于细胞层与细胞接触，液体样品可直接放置；或放置到生物惰性吸水性的基质上与细胞接触。