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当前位置:生物实验 显微成像平台 负染色技术

负染色技术

仪器型号
JEOL JEM-1400Plus;JEOL JEM 1200EX;HITACHI H-7650
预约次数
659
服务周期
5-7个工作日
结果满意度
99.6%

项目简介

 负染色技术是一种制备电子显微镜样品图像呈现复反差的技术。用于观察样品中的颗粒性物质或生物大分子。用金属盐(如磷钨酸钠、醋酸铀等)对铺展在载网上的样品进行染色,使整个载网都铺上一层重金属盐,而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。由于电子密度高的重金属盐包埋了样品中低电子密度的背景,增强了背景散射电子的能力以提高反差,在图像中背景是黑暗的,而未被包埋的样品颗粒则透明光亮,这种染色方法称为负染技术。负染色是只染背景而不染样品,与光学显微镜样品的染色正好相反。目前最常用的负染液是醋酸铀或者磷钨酸,此外甲酸铀、硅钨酸、钼酸铵等也常作负染色剂用。

样品要求

1.将样品取出10 μL。

2.吸取样品10 μL滴加于铜网上沉淀1 min,滤纸吸去浮液。
3.醋酸双氧铀10 μL滴加于铜网上沉淀1 min,滤纸吸去浮液。
4.常温干燥数分钟。
5.80-120 kv进行电镜检测成像。

6.获得透射电镜成像结果。

结果展示

常见问题

1. 样品需要怎么准备?

液体样品提供100-200μl,提供合适的浓度(上机前直接滴加样品,不做稀释或浓缩);粉末样品20mg左右,并告知配置比例。

 

2. 样品需要如何寄送?

根据样品的保存条件,常温保存可直接寄送;4℃保存可以加2-3个冰袋寄送,冰袋一定不要直接接触样品管,用泡沫包裹样品,避免样品结冰,注意冰袋融化不要弄湿预约单、样品管上编号,编号需要按照送样单上的编号,尽量简化编号。

如果是外泌体样品需要干冰寄送,干冰消耗量以每天7kg/d计算,保证足够量的干冰。

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