冷冻透射电镜(Cryo-TEM)是基于超低温冷冻制样寄传输技术,将样品冷却到液氮温度(77K),用于观测蛋白、生物切片等对温度敏感的样品;通过对样品的冷冻,可以降低电子束对样品的损伤,减小样品的形变,从而得到更加真实的样品形貌。
1. 不限于生物样品,可测电子束敏感材料样品,但高分辨图像出图比较困难(和材料电镜相比)。
2. 样品一般是水溶液样品,体积200微升,要求浓度比常温测试大100-1000倍。
3. 有机溶剂的含量不超5%,水溶外的其他溶剂请联系负责老师。
4. 不测挥发有毒有磁性放射性样品。
5. 粉末要求5-10mg,分散剂默认是水,粉末粒度不超1um。
6. 薄膜或块状样品不能直接拍摄,需另行制样(如离子减薄、包埋切片、FIB等)。
1、什么是Cryo-TEM?它与常规TEM有什么区别?
Cryo-TEM是将样品在超低温下(通常为液氮温度,-196°C)进行冷冻后,利用透射电子显微镜进行观察和成像的技术。
核心区别:常规TEM观察的是干燥、脱水、重金属染色的样品,而Cryo-TEM观察的是冷冻、含水、处于近生理状态的样品,水被冻结成“玻璃态冰”,避免了破坏性的冰晶形成。
目的:Cryo-TEM主要用于保留生物样品或软材料的高分辨率原始结构,无需经过可能引入假象的化学处理。
2、做完Cryo-TEM后,我的样品还能回收使用吗?
不能。一旦样品经过高速电子束轰击,其微观结构就已经发生了不可逆的辐射损伤和降解。
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