圆二色光谱仪是一种用于研究手性分子构象和立体结构的光学分析仪器。其原理基于手性化合物对左旋和右旋圆偏振光的吸收差异(即圆二色性),通过测量不同波长下的吸收差(ΔA = A_L - A_R)获得圆二色光谱。该技术对蛋白质二级结构(α-螺旋、β-折叠等)、核酸构型、手性配体与生物大分子相互作用等高度敏感,可定量分析构象变化、稳定性及动力学过程。广泛应用于生物化学、药物开发、材料科学等领域,为解析生命过程中的分子立体化学行为提供关键信息。
【液体CD制样要求】
1. 测试时需要空白溶剂做对照扣背景,麻烦样品及溶剂至少各备5ml;
2. 样品及溶剂的浓度对测试影响较大,不宜过高或过低(浓度过高,会超电压,数据不准;浓度过低,没有信号):不同物质,最佳浓度不同,测试时不对浓度进行摸索
a. 如之前测过CD或有相关文献,建议按对应浓度准备;
b. 如没测过CD或无文献,但扫过紫外全谱,建议优选紫外浓度的一半配制样品,如不合适再调整(直接用紫外对应浓度,测CD的话浓度偏高);
c. 如以上均无,建议按0.5mg/ml来配(蛋白质样品,浓度一般0.1-0.5mg/ml),但无法保证该浓度合适
【固体CD制样要求】
1. 固体CD需要10-20mg,最好是粉末样品,特殊样品可以具体沟通,薄膜尺寸大于3*3cm
2. 如果样品透过率不好,建议采用积分球模式。
1. 下单时,空白样品是否算一个样品?
不算,空白溶剂仅对照用,不另外收费
2. 溶剂或空白对测试的影响有哪些?
液体CD:每种溶剂都有截止波长(可以网上查询),测试范围的最小波长不能低于溶剂的截止波长。(例如乙醇的截止波长205nm,则测试范围最小能到205nm)。缓冲液的浓度过高(一般不高于5mM),很可能在190-200nm会有吸收,从而影响结果。
固体CD:用于压片的溴化钾在195nm以下会有吸收,氯化钾在190nm以下会有吸收,对应的测试范围也只能到195nm或者190nm。
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